fa تأثیر لامینین و ماتریژل بر کلونی‌زایی سلول‌های بنیادی منجمد- ذوب‌شده اسپرماتوگونی در محیط آزمایشگاه آندرولوژی Andrology پژوهشي Research <div class="rounded" style="background: rgb(255, 218, 224); border: 1px solid rgb(250, 115, 115); padding: 5px 10px; text-align: justify;"><span style="font-family:Tahoma;"><span style="font-size:14px;"><span style="line-height:2;"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><b><span lang="AR-SA"><span tahoma=""><span style="color:#fe2e9a"><span style="letter-spacing:-.1pt">سابقه و هدف:</span></span></span></span></b><span lang="AR-SA"><span tahoma=""><span style="color:black">&nbsp;سلول</span></span></span><span dir="LTR"><span tahoma=""><span style="color:black">‌</span></span></span><span lang="AR-SA"><span tahoma=""><span style="color:black">های بنیادی اسپرماتوگونی به‌عنوان سرمنشأ فرایند اسپرماتوژنز تنها سلول‌های بنیادی بالغین هستند که علاوه‌بر تکثیر و خودنوزایی، قدرت انتقال اطلاعات ژنتیکی به نسل بعد را دارند</span></span></span><span lang="FA"><span tahoma=""><span style="color:black">.</span></span></span><span lang="AR-SA"><span tahoma=""><span style="color:black"> این سلول‌ها </span></span></span><span lang="FA"><span tahoma=""><span style="color:black">جایگاه مهمی </span></span></span><span lang="AR-SA"><span tahoma=""><span style="color:black">در </span></span></span><span lang="FA"><span tahoma=""><span style="color:black">طب تولیدمثل، </span></span></span><span lang="AR-SA"><span tahoma=""><span style="color:black">درمان انواع ناباروری و سرطان‌ها دارند. تکثیر این رده سلولی در محیط آزمایشگاه پیش‌نیاز تمامی مطالعات مربوط به آن است. هدف از مطالعه حاضر بررسی تأثیر ماتریکس خارج‌سلولی لامینین و ماتریژل بر القای کلونی‌زایی سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی منجمد- ذوب‌شده در محیط آزمایشگاه است.</span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:"Tahoma",sans-serif"></span></span><br> <b><span lang="AR-SA"><span tahoma=""><span style="color:#fe2e9a"><span style="letter-spacing:.1pt">مواد و روش‌‌ها:</span></span></span></span></b><span lang="AR-SA"><span tahoma=""><span style="color:black">&nbsp;سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی <a name="_Hlk96380006">(</a></span></span></span><span dir="LTR"><span tahoma=""><span style="color:black">SSCs</span></span></span><span lang="FA"><span tahoma=""><span style="color:black">)</span></span></span> <span lang="AR-SA"><span tahoma=""><span style="color:black">از بیضه </span></span></span><span lang="FA"><span tahoma=""><span style="color:black">بره</span></span></span><span lang="AR-SA"><span tahoma=""><span style="color:black"> جـدا و به روش حذف تمایزی خالص‌سازی شدند. سپس بعد از انجماد و یخ‌گشایی در 3 گروه آزمایشی شامل گروه شاهد (کشت ساده سلول‌ها در محیط پایه: </span></span></span><span dir="LTR"><span tahoma=""><span style="color:black">DMEM</span></span></span><span tahoma=""><span style="color:black"> حاوی 1 درصد آنتی‌بیوتیک و 5 درصد سرم گوساله جنین (</span></span><span dir="LTR"><span tahoma=""><span style="color:black">FBS</span></span></span><span lang="FA"><span tahoma=""><span style="color:black">)</span></span></span><span lang="AR-SA"><span tahoma=""><span style="color:black">، تیمار 1 (کشت بر روی لامینین) و تیمار 2 (کشت بر روی ماتریژل) به مدت 10 روز کشت داده شدند. تعداد و مساحت کلونی‌ها در روزهای چهارم، هفتم و دهم در هر گروه محاسبه شد. نشانگرهای اختصاصی سلول‌های اسپرماتوگونی (</span></span></span><span dir="LTR"><span tahoma=""><span style="color:black">plzf, ITGA6, PGP9.5, VASA</span></span></span><span lang="AR-SA"><span tahoma=""><span style="color:black">) نیز با آزمون ایمنوسیتوشیمی</span></span></span><span lang="FA"><span tahoma=""><span style="color:black"> ارزیابی شدند.</span></span></span><br> <b><span lang="AR-SA"><span tahoma=""><span style="color:#fe2e9a"><span style="letter-spacing:.1pt">یافته‌ها:</span></span></span></span></b><b>&nbsp;</b><span lang="AR-SA"><span tahoma=""><span style="color:black">تعداد کلونی‌های تشکیل‌شده در گروه لامینین (</span></span></span><span lang="FA"><span tahoma=""><span style="color:black">6.2</span></span></span><span dir="LTR"><span tahoma=""><span style="color:black">&plusmn;</span></span></span><span lang="FA"><span tahoma=""><span style="color:black">118.92) </span></span></span><span lang="AR-SA"><span tahoma=""><span style="color:black">به‌طور معنی‌داری بیشتر از گروه شاهد </span></span></span><span lang="FA"><span tahoma=""><span style="color:black">(3.8&plusmn;78.08) و</span></span></span> <span lang="FA"><span tahoma=""><span style="color:black">ماتریژل (4.3</span></span></span><span dir="LTR"><span tahoma=""><span style="color:black">&plusmn;</span></span></span><span lang="FA"><span tahoma=""><span style="color:black">95.00) است (0.05</span></span></span><span dir="LTR"><span tahoma=""><span style="color:black">P&le;</span></span></span><span lang="FA"><span tahoma=""><span style="color:black">).</span></span></span><span lang="AR-SA"><span tahoma=""><span style="color:black"> همچنین، مساحت کلونی در گروه لامینین (</span></span></span><span dir="LTR"><span tahoma=""><span style="color:black">mm²</span></span></span> <span lang="FA"><span tahoma=""><span style="color:black">0.30</span></span></span><span dir="LTR"><span tahoma=""><span style="color:black">&plusmn;</span></span></span><span lang="FA"><span tahoma=""><span style="color:black">1.37)</span></span></span><span lang="AR-SA"><span tahoma=""><span style="color:black"> و ماتریژل</span></span></span><span lang="FA"><span tahoma=""><span style="color:black"> (</span></span></span><span dir="LTR"><span tahoma=""><span style="color:black">mm²</span></span></span><span lang="FA"><span tahoma=""><span style="color:black">0.38</span></span></span><span dir="LTR"><span tahoma=""><span style="color:black">&plusmn;</span></span></span><span lang="FA"><span tahoma=""><span style="color:black">1.97) به‌طور </span></span></span><span lang="AR-SA"><span tahoma=""><span style="color:black">معنی‌داری بیشتر از گروه شاهد (</span></span></span><span dir="LTR"><span tahoma=""><span style="color:black">mm²</span></span></span>&nbsp;08&nbsp;<span lang="FA"><span tahoma=""><span style="color:black">.0</span></span></span><span dir="LTR"><span tahoma=""><span style="color:black">&plusmn;</span></span></span><span lang="FA"><span tahoma=""><span style="color:black">&nbsp;0.59)</span></span></span><span lang="AR-SA"><span tahoma=""><span style="color:black"> است </span></span></span><span lang="FA"><span tahoma=""><span style="color:black">(0.05</span></span></span><span dir="LTR"><span tahoma=""><span style="color:black">P&le;</span></span></span><span lang="FA"><span tahoma=""><span style="color:black">).</span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:"Tahoma",sans-serif"></span></span><br> <b><span lang="AR-SA"><span tahoma=""><span style="color:#fe2e9a"><span style="letter-spacing:.1pt">نتیجه‌گیری:</span></span></span></span></b><b>&nbsp;</b><span lang="AR-SA"><span tahoma=""><span style="color:black">استفاده از ماتریکس برون‌سلولی لامینین در کشت سلول‌های اسپرماتوگونی در مقایسه با ماتریژل و کشت ساده بـه‌صـورت معنـی‌داری موجـب افزایش قدرت کلونی‌زایی سلول‌های منجمد اسپرماتوگونی در محیط آزمایشگاه می</span></span></span><span dir="LTR"><span tahoma=""><span style="color:black">‌</span></span></span><span lang="AR-SA"><span tahoma=""><span style="color:black">شود.</span></span></span></span></span></span></span></span></div> <div class="rounded" style="background: rgb(255, 218, 224); border: 1px solid rgb(250, 115, 115); padding: 5px 10px; text-align: justify;"><span style="font-size:14px;"><span style="font-family:Tahoma;"><span style="line-height:2;"><span style="unicode-bidi:embed"><span style="color:black"><b><span style="color:#fe2e9a"><span style="letter-spacing:.15pt">Background and Objective:</span></span></b> <span style="color:#0d0d0d">Spermatogonial stem cells (SSCs) are the only adult stem cells that serve as the origin of spermatogenesis, possessing both proliferation and self-renewal capabilities, as well as the ability to transmit genetic information to the next generation. These cells play a significant role in reproductive medicine, the treatment of various types of infertility, and cancers. The proliferation of this cell line in vitro is a prerequisite for all related studies. The aim of this study was to investigate the in-vitro effects of the extracellular matrix of laminin and matrigel on the colonization of frozen-thawed sheep spermatogonia stem cells.</span></span></span><br> <span style="unicode-bidi:embed"><span style="color:black"><b><span style="color:#fe2e9a"><span style="letter-spacing:-.2pt">Materials and Methods:</span></span></b> <span style="color:#0d0d0d">Spermatogonial stem cells were isolated from the testes of lambs and purified using a differentiation removal method. After freezing and thawing, the cells were cultured for 10 days in three experimental groups: the control group (simple cell culture in basal medium: DMEM containing 1% antibiotics and 5% fetal bovine serum), treatment 1 (cultured on laminin), and treatment 2 (cultured on matrigel). The number and area of colonies were measured on days 4, 7, and 10 in each group. Specific markers for spermatogonial cells (PLZF, ITGA6, PGP9.5, VASA) were also assessed using immunocytochemistry.</span></span></span><br> <span style="unicode-bidi:embed"><span style="color:black"><b><span style="color:#fe2e9a"><span style="letter-spacing:-.2pt">Results:</span></span></b> <span style="color:#0d0d0d">The number of colonies in the laminin group (118.92&plusmn;6.2) was significantly higher than that in the control (78.08&plusmn;3.8) and matrigel groups (95.00&plusmn;4.3) (P&le;0.05). The colony area was significantly higher in the laminin (1.37&plusmn;0.30</span> <span style="color:#0d0d0d">mm²) and matrigel groups (1.97&plusmn;0.38 mm²) than in the control group (0.59&plusmn;0.08</span> <span style="color:#0d0d0d">mm²) (P&le;0.05).</span></span></span><br> <b><span style="color:#fe2e9a"><span style="letter-spacing:-.1pt">Conclusion:</span></span></b> <span style="color:#0d0d0d">The extracellular matrix of laminin can provide a suitable microenvironment for cryopreserved Ovine SSCs in an in vitro</span> <span style="color:#0d0d0d">culture system.</span></span></span></span></div> سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی, لامینین, ماتریژل, انجماد, ایمنوسیتوشیمی Cryopreservation, Immunocytochemistry, Laminin, Matrigel, Spermatogonia stem cells 45 54 http://urology.umsha.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3422-1&slc_lang=fa&sid=1 Sara Mirgheisari سارا میرقیصری sarasadat@gmail.com 10031947532846004532 10031947532846004532 No Department of Clinical Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Kermanshah, Iran گروه علوم بالینی، دانشکده دامپزشکی، کرمانشاه، ایران Peyman Rahimi Fili پیمان رحیمی فیلی peymanrahimi@razi.ac.ir 10031947532846004533 0009-0001-5772-403X Yes Department of Clinical Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Kermanshah, Iran گروه علوم بالینی، دانشکده دامپزشکی، کرمانشاه، ایران Ali Asghar Moghadam علی اصغر مقدّم amoghaddam@razi.ac.ir 10031947532846004534 10031947532846004534 No Department of Clinical Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Kermanshah, Iran گروه علوم بالینی، دانشکده دامپزشکی، کرمانشاه، ایران